реаранжировка генов иммуноглобулинов

Определение B-клеточной клональности при лимфоме Ходжкина

КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ЛИМФОИДНЫХ ОПУХОЛЕЙ , , ,

Ю.В. Сидорова, Н.В. Рыжикова, С.Ю. Смирнова, Е.Е. Никулина, Б.В. Бидерман, А.М. Ковригина, Т.Н. Моисеева, Н.Н. Шаркунов, А.Б. Судариков

ФГБУ «Гематологический научный центр» МЗ РФ, Москва, Российская Федерация

РЕФЕРАТ

В работах R. Kuppers (1994) с помощью микродиссекции и ПЦР-исследования клональности клеток Березовского—Рид—Штернберга и Ходжкина была доказана В-клеточная природа лимфомы Ходжкина. Мы исследовали материал биопсии 35 пациентов с установленным диагнозом лимфомы Ходжкина без применения микродиссекции. В-клеточная клональность оценивалась по реаранжировкам генов IGH (FR1, FR2, FR3) и IGK (Vk-Jk, Vk/intron-Kde). В работе использовался метод ПЦР с мультиплексными системами праймеров BIOMED-2 и последующий фрагментный анализ на генетическом анализаторе ABI PRISM 3130 (Applied Biosystems). Клональность была обнаружена у 11 (31,5 %) из 35 пациентов в парафиновом материале биоптатов лимфатических узлов. В 11 случаях при исследовании материала парафиновых блоков и свежезамороженного наблюдалось совпадение результатов. Не было найдено корреляции между выявлением клональности и возрастом, гистологическим вариантом лимфомы Ходжкина, характером роста опухолевых клеток (синцитиальный или рассеянный), количеством эозинофилов в тканях, экспрессией CD20 и СD15 на поверхности опухолевых клеток. Высокий уровень выявления В-клеточной клональности в материале биопсии не позволяет использовать данный метод для дифференциальной диагностики лимфомы Ходжкина и В-клеточных лимфом.

Ключевые слова: лимфома Ходжкина, B-клеточная клональность, ПЦР, реаранжировка генов иммуноглобулинов.

Читать статью в PDFpdficon

ЛИТЕРАТУРА

  1. Ковригина А.М., Пробатова Н.А. Лимфома Ходжкина и крупноклеточная лимфома. М.: МИА, 2007. [Kovrigina A.M., Probatova N.A. Limfoma Khodzhkina i krupnokletochnye limfomy (Hodgkin’s lymphoma and large-cell lymphomas). M.: MIA, 2007: 212.]
  2. Harris N.L., Jaffe E.S., Stein H. et al. A Revised European-American classification of lymphoid neoplasms: a proposal from the International Lymphoma Study Group. Blood 1994; 84: 1361–92.
  3. Harris N.L., Jaffe E.S., Diebold J. et al. The World Health Organization Classification of Neoplastic Diseases of the Hematopoietic and Lymphoid Tissues. Ann. Oncol. 1999; 10: 1419–32.
  4. Kuppers R., Rajewsky K., Zhao M. et al. Hodgkin disease: Hodgkin and Reed-Sternberg cells picked from histological sections show clonal immunoglobulin gene rearrangements and appear to be derived from B cells at various stages of development. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A 1994; 91: 10962–6.
  5. Marafioti T., Hummel M., Foss H.-D. et al. Hodgkin and Reed-Sternberg cells represent an expansion of a single clone originating from a germinal centre B-cell with functional immunoglobulin gene rearrangements but defective immunoglobulin transcription. Blood 2000; 95: 1443–50.
  6. Re D., Muschen M., Ahmadi T. et al. Oct-2 and Bob-1 deficiency in Hodgkin and Reed Sternberg cells. Cancer Res. 2001; 61: 2080–4.
  7. Jundt F., Kley K., Anagnostopoulos I. et al. Loss of PU.1 expression is associated with defective immunoglobulin transcription in Hodgkin and ReedSternberg cells of classical Hodgkin disease. Blood 2002; 99: 3060–2.
  8. Ushmorov A., Ritz O., Hummel M. et al. Epigenetic silencing of the immunoglobulin heavy-chain gene in classical Hodgkin lymphoma-derived cell lines contributes to the loss of immunoglobulin expression. Blood 2004; 104: 3326–34.
  9. Theil J., Laumen H., Marafioti T. et al. Defective octamer-dependent transcription is responsible for silenced immunoglobulin transcription in ReedSternberg cells. Blood 2001; 97: 3191–6.
  10. Kanzler H., Kuppers R., Hansmann M.L. et al. Hodgkin and ReedSternberg cells in Hodgkin’s disease represent the outgrowth of a dominant tumor clone derived from (crippled) germinal center B cells. J. Exp. Med. 1996; 184: 1495–505.
  11. Brauninger A., Schmitz R., Bechtel D. et al. Molecular biology of Hodgkin’s and Reed/Sternberg cells in Hodgkin’s lymphoma. Int. J. Cancer 2006; 118: 1853–61.
  12. Angel C.A., Pringle J.H., Naylor J. et al. Analysis of antigen receptor genes in Hodgkin’s disease. J. Clin. Pathol. 1993; 46(4): 337–40.
  13. Kamel O.W., Chang P.P., Hsu F.J. et al. Clonal VDJ recombination of the immunoglobulin heavy chain gene by PCR in classical Hodgkin’s disease. Am. J. Clin. Pathol. 1995; 104: 419–23.
  14. Manzanal A., Santon A., Oliva H. et al. Evaluation of clonal immunoglobulin heavy chain rearrangements in Hodgkin’s disease using the polymerase chain reaction (PCR). Histopathology 1995; 27: 21–5.
  15. Chute D.J., Cousar J.B., Mahadevan M.S. et al. Detection of immunoglobulin heavy chain gene rearrangements in classic Hodgkin lymphoma using commercially available BIOMED-2 primers. Diagn. Mol. Pathol. 2008; 17(2): 65–72.
  16. Hebeda K.M., Van Altena M.C., Rombout P. et al. PCR clonality detection in Hodgkin lymphoma. J. Hemat. 2009; 2(1): 34–41.
  17. Burack W.R., Laughlin T.S., Friedberg J.W. et al. PCR assays detect B-lymphocyte clonality in formalin-fixed, paraffin-embedded specimens of classical Hodgkin lymphoma without microdissection. Am. J. Clin. Pathol. 2010; 134(1): 104–11.
  18. Wu L., Patten N., Yamashiro C.T., Chui B. Extraction and amplification of DNA from formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol. 2002; 10: 269–74.
  19. Coombs N.J., Gough A.C., Primrose J.N. Optimisation of DNA and RNA extraction from archival formalin-fixed tissue. Nucl. Acids Res. 1999; 27: e12.
  20. Sidorova J.V., Biderman B.V., Nikulina E.E., Sudarikov A.B. A simple and efficient method for DNA extraction from skin and paraffin-embedded tissues applicable to T-cell clonality assays. Exp. Dermatol. 2012; 21(1): 57–60.
  21. Dongen J.J., Langerak A.W., Bruggemann M. et al. Design and standardization of PCR primers and protocols for detection of clonal immunoglobulin and T-cell receptor gene recombinations in suspect lymphoproliferations: report of the BIOMED-2 Concerted Action BMH4-CT98-3936. Leukemia 2003; 17(12): 2257–317.
  22. Jarrett R.F. Viruses and lymphoma/leukaemia. J. Pathol. 2006; 208(2): 176–86.
  23. Al Saati T., Galoin S., Gravel S. et al. IgH and TcR-gamma gene rearrangements identified in Hodgkin disease by PCR demonstrate lack of correlation between genotype, phenotype, and Epstein–Barr virus status. J. Pathol. 1997; 181(4): 387–93.
  24. Manzanal A.I., Santon A., Acevedo A. et al. Molecular analysis of the IgH gene in 212 cases of Hodgkin’s disease: correlation of IgH clonality with the histologic and the immunocytochemical features. Mod. Pathol. 1997; 10(7): 679–85.